食用油塑料桶中

本实验采用索氏提取法对塑料桶中的PAEs进行提取，并通过响应面法对影响PAEs提取的因子水平及其交互作用进行优化与评价，为检测食用油塑料桶中PAEs含量提供。

　　1材料与方法1.1试剂和仪器准库：日本岛津公司；电子天平：上海精科天平有限公司；索氏提取器：北京中西泰安技术服务有限公司；氮气吹扫仪：上海天呈科技有限公司。

　　正己烷、甲醇、乙醚、三氯甲烷由成都科龙试剂化工厂提供；DBP（邻苯二甲酸二丁酯）、DEHP仪器有限公司提供；食用油塑料桶。

　　1.2提取工艺将食用油塑料桶依次用脱脂棉沾取去离子水、乙醚擦洗干净，剪成2mmX2mm大小并将其粉碎成粉末。称取2g样品，置于粗脂肪提取仪的抽提筒中，加入乙醚30mL索氏抽提。用氮气流吹干溶剂后，甲醇将残留物定容至10mL，上机进样。

　　1.3色谱和质谱条件10pm）；载气为高纯度氦气，载气流速1mL/min；进样口温度：250C；柱温条件为初始温度150C，保持1皿n，以/min升温至260C，保持5皿n.进样量1L；分流进样，分流比50电子轰击（EI）离子源；电离能量70eV；离子源温度；四极杆温度150C；接口温度280C；全扫描（SCAN）质量范围：40m/z~400m/z；DBP定性离子为149、177、176、150，DEHP定性离子为149、167、71、57，两者的定量离子均为149. 1.4标准曲线的制作取DBP和DEHP的混合标准系列溶液（1.0mg/L、0mg/L），按照上述色谱和质谱条件进行分析，外标法定量。每次进样1pL，平行测定创新与借鉴bookmark1中国酿造bookmark2 3次，以峰面积y对浓度x（mg/L）进行线性回归，回归方程和相关系数，见表1.表1组分名称线性范围/相关系数线性方程检出限/ 1.5试验方法1.5.1单因素试验在其他条件相同的情况下，分别考察不同的提取试剂、料液比、提取温度、提取时间对食用油塑料桶中PAEs索氏提取的影响。

　　1.5.2响应面试验设计通过单因素试验确定影响食用油塑料桶中PAEs索氏提取的关键因素，以食用油塑料桶中PAEs提取量为响应值，采用响应面模型对关键因素进行中心组合设计试验，从而对提取优化进行条件。

　　2结果与讨论2.1单因素试验2.1.1提取试剂对PAEs提取的影响称取2g粉碎的食用油塑料桶样品，在提取时间4h，提取温度70C，30mL提取试剂条件下，不同提取试剂对PAEs提取的影响，试验结果见表2.表2提取试剂对PAEs提取的影响提取试剂乙醚三氯甲烷正己烷甲醇PAEs提取量/由表2可知，4种提取试剂对PAEs提取的影响次序为：三氯甲烷>乙醚>正己烷>甲醇。较其他3种提取试剂，三氯甲烷与PAEs的极性更相似，更易提取塑料中的PAEs，试验选择三氯甲烷为提取试剂。

　　2.1.2提取温度对邻苯二甲酸酯提取的影响称取2g粉碎的食用油塑料桶样品，在提取时间4h，30mL三氯甲烷提取条件下，不同提取温度对PAEs提取的影响，试验结果见表3.表3提取温度对PAEs提取的影响提取温度/C PAEs提取量/由表3可知，提取温度<60C时，PAEs提取量随提取温度的升高而显著增加；提取温度>60C时，PAEs提取量随提取温度的升高而略有降低；提取温度在60C时，PAEs提取量最大。当提取温度过小，PAEs不易从塑料中迁移出；当提取温度过高，增加了其他杂质迁移量影响检测结果，并且温度过高导致PAEs的分解损失。

　　2.1.3提取时间对邻苯二甲酸酯提取的影响称取2g粉碎的食用油塑料桶样品，在提取温度60C，30mL三氯甲烷条件下，不同提取时间对PAEs提取的影响，试验结果见表4.表4提取时间对PAEs提取的影响Table提取时间/h2 PAEs提取量由表4可知，提取时间<6h，PAEs提取量随提取时间的增加而显著增加；提取时间超过6h，PAEs提取量随提取时间的增加而略有降低，提取时间为6h时，PAEs含量最大。当提取时间较短时，PAEs提取量随时间的增加而逐渐地从塑料桶中迁移出，当时间过长时，PAEs随时间的延长发生部分分解，造成测定结果偏低。

　　2.1.4料液比对邻苯二甲酸酯提取的影响称取2g粉碎的食用油塑料桶样品，在提取温度60C，提取时间6h下，量取不同体积的三氯甲烷，考察不同料液比对PAEs提取的影响，试验结果见表5.表5料液比对PAEs提取的影响料液比PAEs提取量由表5可知，料液比小于2：30时，PAEs提取量随料液比的增加而略有增加；料液比大于2：30时，PAEs提取量随料液比的增加而减少；料液比为2：30时，PAEs提取量最大。在料液比较小的时，提取试剂量较大，导致杂质迁移出较多，影响了PAEs的检测；当料液比较大时，塑料质量较多，提取试剂对PAEs提取不够充分。

　　2.2响应面分析及结果在单因素试验的基础上，用三氯甲烷为提取试剂，选取相关性密切的提取温度、提取时间、液料比3因素，以PEAs提取量为响应值，进行Box~Behnken设计试验。Box~Be-hnken设计试验因素水平及编码值见表6，Box~Behnken试验设计及结果见表7.表6Box~Behnken设计试验因素水平及编码值表8回归模型的方差分析变量代码编码水平编码未编码-10+1提取温度/tX！A6062.565提取时间/hX2B456料液比/方差来源方差自由度方差F值P值模型8070.999896.7821.870.0003A657. ofmodel模型平均值复相关系数R2校正系数RAdY的变异系数CV信噪比多元回归拟合，获得PAEs提取量（D对提取温度（A）、提取时间（B）、料液比（C）的二次多项回归模型方程：0003，模型是显著的，说明回归方程描述因子与响应值之间的关系时，其因变量与全体自变量之间的线性关系显著，即这种试验方法是可靠的。

　　失拟项P值为0.1020 >0.05，失拟项不显著，表明所建模型拟合性好，试验误差小。在一次项中，A、B、C项的P值小于0.05，表明A、B、C项差异性显著；在二次项中A2、B2、C2的户值均小于0.05，表明A2、B2、C2项差异性显著；在交互项中，AB、AC、BC项的户值大于0.05，表明AB、AC、BC项差异性不显著。

　　提取时间与提取温度对PAEs提取影响的等高线（A）和响应曲面（B）Figure创新与借鉴bookmark3中国酿造bookmark4 9215，R2值均接近1，说明此模型能预测其响应值；信噪比为13.694，大于4是合意的，表明有很强的信号；Y的变异系数CV表示试验的精确度，试验的CV值为4. 16，CV值低说明试验的精确度高，试验操作可信。综上表明该模型能很好地解释响应值的变化。

　　由可知，在料液比为2：26.7时，提取时间与提取温度对PAEs提取的交互效应不显著。提取温度对PAEs提取的影响较大，表现为曲线较陡；提取时间对PAEs提取的影响较小，表现为曲线较为平滑。随着提取时间与提取温度的升高，PAEs提取量逐渐变大，但当这两个值的增大到一定程度，PAEs提取量逐渐减小，说明过高或过低的提取时间和提取温度都会影响PAEs的提取，PAEs提取量最大出现在提取时间为4.95h，提取温度为62.5C时。

　　拟取时>1料液比与提取时间对PAEs提取影响的等高线（A）和响应曲面（B）Figure3.Contourlines（A）料液比与提取温度对PAEs提取影响的等高线（A）和响应曲面（B）由可知，在提取时间为5h时，料液比与提取温度对PAEs提取的交互效应不显著；随着料液比与提取温度的增加，PAEs提取量逐渐增加，当两个因素增加到一定程度，PAEs提取量又逐渐减小，说明过高或过低的料液比和提取温度都会影响PAEs的提取，PAEs提取量最大出现在提取温度为62. 5C，料液比为2由可知，在提取温度水平为62. 5C时，料液比与提取时间对PAEs提取的交互效应不显著；随着洗脱速率和洗脱体积的增加，PAEs提取量逐渐变大，但当这两因素值的增加到一定程度，PAEs提取量逐渐减小，说明过高或过低的料液比和较短较长的提取时间都会影响PAEs提取，PAEs的最大提取量出现在料液比为2：26.4，提取时间为4.95h时。

　　2.3验证试验条件得到的理论最佳值为：提取温度62.9C、提取时间4.95h、料液比2：26.4；得出的PAEs提取量预测值为110.137mg/kg.考虑试验的可操作性，选取提取温度63C、提取时间5h、料液比2：26.4进行验证试验，得到PAEs提取量实际值为108.782mg/kg，相对误差小于10%，响应面法优化PAEs固相萃取条件是可行的。

　　3结论通过单因素试验，确定了食用油塑料桶中PAEs索氏提取的最佳条件为：提取试剂三氯甲烷、提取温度62.提取时间5.0h、料液比2：30.通过Box~Behnken响应曲面法试验，确定了塑料中PAEs索氏提取的最佳试验条件为：提取温度63°C、提取时间5h、料液比2：26.4.以该优化条件对食用油塑料桶中PAEs进行索氏提取，得到PAEs提取量为108.782mg/kg，较优化前有较大提高，提高了检测食用油塑料桶中PAEs含量的准确度。